Определение частот мутаций в гене муковисцидоза, обуславливающих восстановление функции повреждённого белка антибиотиками аминогликозидного ряда
678
Вт, 23 Янв 2018

Авторы:

Зобкова Г.Ю.

Введение


Муковисцидоз – одно из наиболее частых аутосомно-рецессивных заболеваний с полиорганным поражением, характеризующееся нарушениями в гене CFTR,  кодирующем одноимённый белок – трансмембранный регулятор муковисцидоза. Он  находится в выводных протоках желез внешней секреции и отвечает за транспорт электролитов. При нарушениях структуры белка увеличивается вязкость  секрета и развивается благоприятная среда для роста и размножения патогенной  микрофлоры. Поэтому при лечении больных муковисцидозом антибиотики являются  незаменимым компонентом терапии. Однако, было установлено, что антибиотики амингликозидного ряда, в частности гентамицин, выполняют не только  свою непосредственную роль в борьбе с инфекцией, но и могут частично  восстанавливать функцию повреждённого белка при мутациях 1 класса (нонесенс- мутации) в особенности при мутации W1282X [1]. Как выяснилось в ряде исследований,  эффект гентамицина связан с частичной супрессией стоп-кодонов. В  настоящее время в большинстве случаев, диагноз муковисцидоз выставляется по  результатам неонатального скрининга на муковисцидоз, который включает 4 этапа:  выявление иммунореактивного трипсина (ИРТ) в высушенном пятне крови, повторный  ИРТ, потовый тест и ДНК-диагностику, при этом только первые 3 пункта являются  обязательными [2]. Таким образом, ДНК диагностика проводится не всем детям. 


Цель


Определить частоты пациентов, потенциально отвечающих на терапию гентамицином  как препаратом, помогающим восстанавливать функцию повреждённого белка. 


Материалы и методы


В исследовании участвовали 202 ребенка с клиническим диагнозом муковисцидоз и  наблюдавшиеся в ФГБУ «РДКБ» Минздрава России в 2015–2017 гг. Для диагностики  была использована периферическая кровь. 
Полученные образцы ДНК сразу использовали для генотипирования или хранили при – 20 °С. Молекулярно-генетический анализ включал в себя определение 24 наиболее  значимых на территории РФ мутаций ассоциированных с муковисцидозом: F508del,  L138ins, G542X, E92K, W1282X, R117H, N1303K, 604insA, 2143delT, 621 + 1G>T,  2184insA, S1196X, 3849 + 10kbC>T, 3821delT, dele 2,3 (21kb), 3667insTCAA, R334W,  1677delTA, 394delTT, 2183AA>G, R553X, 2789+5G>A, K598ins, 3944delGT [3]. 


Результаты


В результате генотипирования было выявлено 342 патогенные аллели, 6 из которых  были ассоциированы с мутацией W1282X, у пяти пациентов соответственно. У двух  пациентов из них была найдена лишь одна мутация. Генотипы пациентов с W1282X  были распределены следующим образом: W1282X/? (вторая мутация не найдена),  W1282X/? (вторая мутация не найдена), W1282X/F508del? W1282X/W1282X,  W1282X/1677delTA. 


Заключение


Таким образом, у пяти пациентов из 202 (2,5 %) терапия гентамицином может  улучшить клиническое проявление заболевания. Однако следует помнить о побочных  эффектах препарата и применять его с осторожностью. Генотипирование пациентов с  муковисцидозом может не только помочь в установлении диагноза и проведении  пренатальной диагностики при дальнейшем деторождении, но может повлиять на  выбор тактики при лечении пациента. 

Литература


1. Linde L., Boelz S., Nissim-Rafinia M., Oren Y.S., Wilschanski M., Yaacov Y. et al.  Nonsense-mediated mRNA decay affects nonsense transcript levels and governs response of  cystic fibrosis patients to gentamicin. J. Clin. Invest. 2007, 117: 683–692. 
2. Баранова А.А. Федеральные клинические рекомендации по оказанию медицинской  помощи детям с кистозным фиброзом (муковисцидозом). 2015, 54 с. 
3. Петрова Н.В. Молекулярно-генетические и клинико-генотипические особенности  муковисцидоза в российских популяциях [диссертация]. Mосква; 2009, 141 с. 

Похожие статьи

Топ 10 за все время